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課程簡介
Fiji與ImageJ生態系統入門
- 理解Fiji的架構:ImageJ核心、插件和更新管理器
- 安裝、環境設置和配置啓動時的自動更新
- 導航GUI:窗口、工具欄、堆棧/系列管理和鍵盤快捷鍵
- 支持的科學格式:TIFF、OME-TIFF、ND2、LIF、HDF5和元數據標準
- 實驗1:安裝Fiji,配置更新管理器以自動更新,並導航多通道熒光顯微鏡數據集
核心圖像處理與定量分析
- 基本變換:裁剪、旋轉、縮放和通道分離
- 濾波與增強:高斯、中值、CLAHE和降噪技術
- 分割與特徵提取:閾值、分水嶺、ROI管理器和粒子分析
- 量化:直方圖分析、顏色反捲積、共定位指標和統計導出
- 實驗2:在樣本細胞成像數據集上構建可重複的2D/3D分析管道,並導出結構化測量表
腳本編寫、自動化與多語言工作流
- Fiji腳本編輯器:編寫、運行、調試和參數化腳本
- 選擇正確的語言:Python(PyImageJ/ImgLib2)、JavaScript(Nashorn)、Groovy和Beanshell
- 將Fiji與科學計算生態系統(NumPy、SciPy、pandas、scikit-image)橋接
- 宏錄製與腳本編寫:何時使用每種方法以及如何維護乾淨、可重用的代碼
- 實驗3:編寫Python腳本以批處理z-stack,提取細胞指標,並自動生成摘要圖和CSV報告
高級工作流:3D成像、拼接與大型數據集
- 處理多維生物圖像數據:虛擬堆棧、延遲加載和內存管理
- 平鋪顯微鏡基礎:採集模式、圖塊編號和重疊處理
- 拼接大型3D數據集:使用BigStitcher和TrakEM2進行配準和合並
- 針對硬件受限環境的性能優化(RAM、GPU提示、雲準備)
- 實驗4:配準和拼接模擬的平鋪3D顯微鏡數據集,並優化>10GB z-stack的內存使用
擴展Fiji:ImgLib2、插件開發與部署
- ImgLib2數據模型:N維數組、視圖和內存高效操作
- 使用ImgLib2和ImageJ2 API構建自定義圖像處理算法
- 插件打包:Maven結構、UI集成和依賴管理
- 共享與部署:創建本地/全局更新站點、Docker容器和可重複的研究包
- 跨團隊協作:標準化參數、管道的版本控制和跨實驗室共享
- 實驗5:開發一個基於ImgLib2的自定義插件,在本地進行測試,並將其發佈到共享更新站點
可重複性、最佳實踐與研究集成
- 捕獲來源:在結果中嵌入腳本、參數和Fiji版本信息
- 科學圖像數據的元數據標準與FAIR原則
- 性能分析、調試和解決常見的生物圖像瓶頸
- 社區資源:ImageJ/Fiji文檔、論壇、GitHub倉庫和插件生態系統
- 最終項目:設計、編寫並記錄一個完整的圖像分析工作流,針對您的研究領域進行定製
- 定製選項:我們提供專注於以下內容的定製版本:
- 特定成像模式(共聚焦、超分辨率、電子顯微鏡等)
- 領域特定的管道(細胞計數、共定位、形態計量等)
- 與現有實驗室基礎設施的集成(Slurm、AWS、本地HPC或OME-TIFF存檔)
最低要求
- 對腳本或編程概念有基本瞭解
- 熟悉Java會有幫助,但不是必需的
- 強烈建議具備科學學科背景(如生物學、化學、物理學)
受衆
- 科學家與研究人員(生物學、材料科學、醫學成像等領域)
- 處理顯微鏡或科學圖像的數據分析師與開發者
- 希望標準化圖像分析工作流程的實驗室經理
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